विशेषज्ञों के अंतरराष्ट्रीय निकायों द्वारा सलाह के अनुसार वर्तमान में प्रचलित COVID-19 के निदान के लिए प्रयोगशाला परीक्षणों की समीक्षा और मूल्यांकन किया जाता है।
चीन के वुहान शहर से शुरू हुई कोविड-19 बीमारी अब तक 208 से अधिक देशों को प्रभावित कर चुकी है। पिछले कुछ महीनों में, विश्व भर के वैज्ञानिक समुदाय के सामने कोविड-19 बीमारी का पता लगाने के लिए नैदानिक परीक्षण विकसित करने की एक महत्वपूर्ण चुनौती खड़ी हो गई है, ताकि रोगियों और संदिग्ध व्यक्तियों की जांच करके महामारी का प्रभावी ढंग से प्रबंधन और नियंत्रण किया जा सके।
कोविड-19 का पता लगाने के लिए वर्तमान में उपयोग की जाने वाली विधियों और प्रक्रियाओं का मूल्यांकन करने से पहले, आइए पहले यह समझें कि कोविड-19 किस कारण से होता है और इस बीमारी के लिए रोगियों की जांच हेतु नैदानिक परीक्षण कैसे विकसित किए जाते हैं। कोविड-19 रोग एक धनात्मक RNA वायरस के कारण होता है जो ज़ूनोटिक होता है, जिसका अर्थ है कि यह प्रजातियों की बाधाओं को पार करके जानवरों से मनुष्यों में फैल सकता है, और मनुष्यों में सामान्य सर्दी से लेकर MERS और SARS जैसी अधिक गंभीर बीमारियों तक का कारण बन सकता है। कोविड-19 का कारण बनने वाले वायरस को अब अंतर्राष्ट्रीय वायरस वर्गीकरण समिति (ICTV) द्वारा SARS-CoV-2 नाम दिया गया है, क्योंकि यह SARS के प्रकोप का कारण बनने वाले वायरस (SARS-CoVs) से बहुत मिलता-जुलता है। कोविड-19 रोग के लिए नैदानिक परीक्षण कई तरीकों से विकसित किए जा सकते हैं।
विश्व स्तर पर सबसे लोकप्रिय और वर्तमान में अपनाई जाने वाली विधि SARS-CoV-2 वायरस का पता लगाने वाले नैदानिक परीक्षण को विकसित करना है। यह परीक्षण रोगी के नमूने में वायरल जीनोम का पता लगाने के लिए RT-रियल टाइम PCR (रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेज़-रियल टाइम पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन) पर आधारित है। इसमें रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेज़ नामक एंजाइम का उपयोग करके वायरल RNA को DNA में परिवर्तित किया जाता है और फिर टैग पॉलीमरेज़ का उपयोग करके विशिष्ट प्राइमर और एक फ्लोरोसेंट प्रोब के एक सेट के साथ DNA को प्रवर्धित किया जाता है, जो वायरल DNA पर एक विशिष्ट क्षेत्र से जुड़ते हैं और फ्लोरोसेंट सिग्नल का पता लगाते हैं। इन परीक्षणों को NAATs (न्यूक्लिक एसिड एम्प्लीफिकेशन टेस्ट) कहा जाता है। यह तकनीक रोगी के नमूने में न्यूक्लिक एसिड की उपस्थिति का शीघ्र पता लगाने के लिए बहुत उपयोगी हो सकती है, यहां तक कि उन रोगियों में भी जिनमें COVID-19 रोग के लक्षण नहीं दिखते (विशेष रूप से 14-28 दिनों की ऊष्मायन अवधि में) और बाद में भी जब रोग पूरी तरह से विकसित हो जाता है।
सीडीसी (रोग नियंत्रण केंद्र), अटलांटा, यूएसए और डब्ल्यूएचओ दिशानिर्देशों के आधार पर SARS-CoV-2 का पता लगाने के लिए NAAT आधारित नैदानिक परीक्षण विकसित करने के लिए दुनिया भर की विभिन्न कंपनियां पिछले कुछ महीनों के दौरान समय के खिलाफ दौड़ में काम कर रही हैं। 1, 2)। दुनिया भर के स्वास्थ्य अधिकारी SARS-CoV-2 का पता लगाने के लिए आपातकालीन उपयोग के लिए इन परीक्षणों को मंजूरी देते रहे हैं। अब तक लक्षित वायरल जीन में उपयुक्त सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण के साथ-साथ एन, ई, एस और आरडीआरपी जीन शामिल हैं। इस तरह के परीक्षण के लिए एकत्र किए जाने वाले रोगी के नमूने ऊपरी श्वसन पथ (नासोफेरींजल और ऑरोफरीन्जियल स्वैब) और / या निचले श्वसन पथ (थूक और / या एंडोट्रैचियल एस्पिरेट या ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज) से होते हैं। हालांकि, मल और रक्त सहित अन्य नमूनों में भी वायरस का पता लगाना संभव है। सभी आवश्यक सावधानी बरतते हुए और जैव सुरक्षा प्रथाओं (डब्ल्यूएचओ द्वारा निर्धारित दिशानिर्देशों के अनुसार) का पालन करते हुए, COVID-1 के लिए संदिग्ध मामले की परिभाषा को पूरा करने वाले रोगियों से, इसे संरक्षित और पैकेजिंग करते हुए नमूनों को उचित तरीके से तेजी से एकत्र करने की आवश्यकता है। अच्छी तरह से अगर इसे डायग्नोस्टिक सेंटर में ले जाने की आवश्यकता होती है और फिर नमूना अखंडता सुनिश्चित करने के लिए तेजी से संसाधित किया जाता है (बीएसएल -19 या समकक्ष सुविधा में जैव सुरक्षा कैबिनेट में आरएनए निकालना)। बेहतर नैदानिक प्रबंधन और प्रकोप नियंत्रण के लिए यह सब प्राथमिकता के आधार पर करना होगा।
दुनिया भर में प्रमुख नैदानिक कंपनियों द्वारा विकसित विभिन्न उपलब्ध NAAT आधारित परीक्षणों के लिए पता लगाने का समय 45 मिनट से 3.5 घंटे तक भिन्न होता है। एक दिन में किए जा सकने वाले परीक्षणों की संख्या में वृद्धि करने के लिए, परिणाम की सटीकता से समझौता किए बिना, इन परीक्षणों को देखभाल परीक्षणों में बदलने और परिणाम की सटीकता से समझौता किए बिना यथासंभव कम समय में वांछित परिणाम प्राप्त करने के लिए विभिन्न सुधार किए जा रहे हैं।
अन्य नैदानिक परीक्षण विकल्प रैपिड डायग्नोस्टिक टेस्ट (आरडीटी) हैं जो या तो वायरल एंटीजन/प्रोटीन का पता लगाते हैं जो SARS-CoV-2 वायरस कणों की सतह पर व्यक्त होते हैं क्योंकि वे मेजबान कोशिकाओं में प्रतिकृति करते हैं और बीमारी का कारण बनते हैं या संक्रमण के जवाब में मेजबान एंटीबॉडी; यह परीक्षण उन लोगों के रक्त में एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाता है जिनके बारे में माना जाता है कि वे COVID-19 से संक्रमित हैं (3)।
वायरल एंटीजन का पता लगाने के लिए आरडीटी की सटीकता और पुनरुत्पादन कई कारकों पर निर्भर करता है, जिसमें बीमारी की शुरुआत से समय, नमूने में वायरस की एकाग्रता, नमूने की गुणवत्ता और प्रसंस्करण और परीक्षण किट में मौजूद अभिकर्मकों का निर्माण शामिल है। इन चरों के कारण, इन परीक्षणों की संवेदनशीलता 34% से 80% तक भिन्न हो सकती है। इस विकल्प का एक बड़ा दोष यह है कि वायरल प्रोटीन का पता लगाने के लिए वायरस को अपनी प्रतिकृति और संक्रामक अवस्था में होना चाहिए।
इसी तरह, मेजबान एंटीबॉडी का पता लगाने वाले परीक्षण एंटीबॉडी प्रतिक्रिया की ताकत पर आधारित होते हैं जो उम्र, पोषण की स्थिति, बीमारी की गंभीरता और कुछ दवाओं या संक्रमण जैसे कारकों पर निर्भर करता है जो प्रतिरक्षा प्रणाली को दबाते हैं। इस विकल्प का एक बड़ा दोष यह है कि SARS-CoV-2 वायरस से संक्रमण के बाद एंटीबॉडी का उत्पादन दिनों से लेकर हफ्तों तक होता है और परीक्षण करने के लिए इतना लंबा इंतजार करना पड़ता है। इसका मतलब यह है कि मेजबान एंटीबॉडी प्रतिक्रिया के आधार पर सीओवीआईडी -19 संक्रमण का निदान अक्सर पुनर्प्राप्ति चरण में ही संभव होगा, जब नैदानिक हस्तक्षेप या रोग संचरण की रोकथाम के कई अवसर पहले ही बीत चुके हैं।
वर्तमान में, ऊपर उल्लिखित आरडीटी को केवल एक शोध सेटिंग में अनुमोदित किया गया है, न कि डेटा की कमी के कारण नैदानिक निदान के लिए (3, 4)। जैसे-जैसे COVID-19 के लिए अधिक से अधिक महामारी विज्ञान के आंकड़े उपलब्ध होंगे, नैदानिक सेटिंग में देखभाल परीक्षणों के बिंदु के रूप में अधिक RDT विकसित और स्वीकृत किए जाएंगे क्योंकि वे NAAT आधारित परीक्षणों के विपरीत 10-30 मिनट में परिणाम दे सकते हैं जो औसतन लगते हैं। रोग का पता लगाने के लिए कुछ घंटे।
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सन्दर्भ:
1. डब्ल्यूएचओ, 2020। COVID-19 के लिए प्रयोगशाला परीक्षण रणनीति सिफारिशें। अंतरिम मार्गदर्शन। 21 मार्च 2020। ऑनलाइन उपलब्ध है https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf 09 अप्रैल 2020 को एक्सेस किया गया
2. सीडीसी 2020। प्रयोगशालाओं के लिए सूचना। ऑनलाइन उपलब्ध प्रयोगशालाओं के लिए अंतरिम मार्गदर्शन https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html 09 अप्रैल 2020 को एक्सेस किया गया।
3. डब्ल्यूएचओ, 2020। प्वाइंट ऑफ केयर टेस्ट के उपयोग पर सलाह। वैज्ञानिक संक्षिप्त। 08 अप्रैल 2020। ऑनलाइन उपलब्ध है https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 09 अप्रैल 2020 को एक्सेस किया गया।
4. ईसीडीसी, 2020। ईयू/ईईए में कोविड-19 के निदान के लिए रैपिड टेस्ट सिचुएशन का अवलोकन। 01 अप्रैल 2020। यूरोपियन सेंटर फॉर डिजीज प्रिवेंशन एंड कंट्रोल। पर ऑनलाइन उपलब्ध है https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea 09 अप्रैल 2020 को एक्सेस किया गया
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