हाल ही में प्रकाशित आरटीएफ-एक्सपायर विधि द्वारा परख का समय काफी कम हो गया है, जो लगभग एक घंटे से घटकर कुछ मिनटों तक रह गया है। इस विधि में आरएनए को डीएनए में परिवर्तित करने के लिए रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस-मुक्त (आरटीएफ) दृष्टिकोण का उपयोग किया जाता है , जिसके बाद एकल तापमान पर प्रवर्धन के लिए एक्सपायर (घातीय प्रवर्धन प्रतिक्रिया) का उपयोग किया जाता है।
कोविड-19 के प्रसार की दर को नियंत्रित करने के लिए एक सटीक और तीव्र वायरस परीक्षण रणनीति की आवश्यकता है। आरटी-पीसीआर (रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन), जो वर्तमान में उपयोग की जाने वाली सबसे सटीक परीक्षण विधि है, एक दो-चरणीय परीक्षण है जिसमें प्रति नमूना लगभग 60 मिनट लगते हैं।
बर्मिंघम विश्वविद्यालय के शोधकर्ताओं ने SARS-CoV-2 का पता लगाने के लिए एक नई विधि की सूचना दी है। यह बहुत तेज़ परीक्षण को सक्षम कर सकता है और पर्याप्त रूप से संवेदनशील है।
आरटी-पीसीआर (रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेज़ पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन) द्वारा वायरल आरएनए का पता लगाने में वायरल आरएनए को पूरक डीएनए (सीडीएनए) में परिवर्तित करना शामिल है, जिसके बाद सीडीएनए का मात्रात्मक पीसीआर (क्यूपीसीआर) द्वारा प्रवर्धन किया जाता है। फिर सीडीएनए का पता फ्लोरोसेंट डाई का उपयोग करके लगाया जाता है। इसमें एक घंटे तक का समय लग सकता है।
नई RTF-EXPAR विधि द्वारा परीक्षण का समय लगभग एक घंटे से घटकर कुछ मिनटों तक कम हो जाता है। इस विधि में RNA को DNA में परिवर्तित करने के लिए रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेज़-मुक्त (RTF) विधि का उपयोग किया जाता है , जिसके बाद एकल तापमान पर प्रवर्धन के लिए EXPAR (एक्सपोनेंशियल एम्प्लीफिकेशन रिएक्शन) का प्रयोग किया जाता है। एकल तापमान पर होने वाला प्रवर्धन ही इसकी गति का मुख्य कारण है, क्योंकि इससे RT-PCR की लंबी तापन और शीतलन प्रक्रिया से बचा जा सकता है। इसके अलावा, RT-PCR की तुलना में प्रवर्धित होने वाले DNA का भाग छोटा होता है। इसलिए, EXPAR कुछ ही मिनटों में 108 तक DNA स्ट्रैंड उत्पन्न कर सकता है। RT-PCR विधि की तरह ही, SYBR ग्रीन नामक फ्लोरोसेंट डाई का उपयोग करके डुप्लेक्स निर्माण की निगरानी की जाती है।
दिलचस्प बात यह है कि आरएनए वायरस के कारण होने वाले कई अन्य संक्रामक रोगों का पता लगाने के लिए नई विधि को संशोधित किया जा सकता है, उदाहरण के लिए इबोला, आरएसवी, आदि।
स्रोत (ओं):
कार्टर एट अल (2020)। रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेज़-मुक्त एक्सपोनेंशियल एम्प्लीफिकेशन रिएक्शन, आरटीएफ-एक्सपीएआर का उपयोग करके एसएआरएस-कोवी-2 आरएनए का 5 मिनट से कम समय में पता लगाना। प्रीप्रिंट। मेडआरएक्सिव पर प्रकाशित। दिनांक 04 जनवरी, 2021। डीओआई: https://doi.org/10.1101/2020.12.31.20248236
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